首页>疾病监测杂志
  • 杂志名称:疾病监测杂志
  • 主管单位:中国疾病监测
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-2928/R
  • 国内刊号:11-2928/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:荣获2003年《CAJ-CD规范》执行优秀期刊奖期刊收录:知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
疾病监测杂志2016年第09期

基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因检测方法的建立与评价

韩艳青;侯凤伶;张淑红;申玉学;史红;关文英;申志新

关键词:副溶血弧菌, 大流行菌群, 耐热直接溶血素, 耐热直接溶血素相关溶血素, 群特异PCR, 多重PCR
摘要:目的 基于多重聚合酶链反应(PCR)建立一种快速方便的检测副溶血弧菌“大流行菌群”及其毒力基因的方法.方法 结合副溶血弧菌“大流行菌群”的群特异鉴定方法GS-PCR,与副溶血弧菌致病相关的耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)序列设计引物,建立并优化多重PCR检测方法.用已知的大流行菌株和非大流行临床分离株,对其进行特异性、灵敏度等性能的评价.并对224株食品分离株和3株临床分离株副溶血弧菌进行了再鉴定.结果 副溶血弧菌“大流行菌群”有群特异PCR标识基因和tdh扩增条带.而其他细菌扩增结果呈阴性.检测灵敏度可达到105 CFU/ml.对实验室保存的224株食品分离株和3株临床分离株进行再鉴定表明,其中5株为副溶血弧菌“大流行菌群”,其中3株为tdh阳性、trh阴性,2株tdh、trh均阴性.结论 本研究所建立的多重PCR方法特异性好、灵敏度高.为副溶血弧菌“大流行菌群”及其毒力基因的快速大规模检测提供良好的技术支持.