期刊简介
本刊积极贯彻“预防为主”的工作方针，突出快、简、新和实用性强的特色，及时准确地向国内外报道传染病疫情及动态。
往期目录
-
1986
-
1988
-
1989
-
1991
-
1992
-
1994
-
1995
-
1997
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>疾病监测杂志
- 杂志名称：疾病监测杂志
- 主管单位：中国疾病监测
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-2928/R
- 国内刊号：11-2928/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：荣获2003年《CAJ－CD规范》执行优秀期刊奖期刊收录：知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
人偏肺病毒F1 、F2亚单位原核表达系统的构建及多克隆抗体制备
郭丽茹；李晓燕；孔梅；刘英华；邹明；苏旭
关键词：人偏肺病毒, F1、F2亚单位, 多克隆抗体
摘要：目的 构建人偏肺病毒融合蛋白亚单位F1、F2原核表达系统,初步获得抗F1、F2重组蛋白的多克隆抗体,为相关疫苗的研究奠定基础.方法 聚合酶链反应(PCR)法扩增F1、F2基因片段,经T-A克隆确保其准确性,双酶切后插入原核表达载体pET32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),按优化后条件大量诱导表达,纯化后经Western Blot检测特异性.取纯化蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA法检测效价,间接免疫荧光法(IFA)检测多克隆抗体是否能与人偏肺病毒发生特异性反应.结果 F1、F2基因均正确插入pET32a(+)中,并具有正确的读码框架.0.5 mmol/L IPTG 37℃诱导培养5h可获得大量带His标签的重组蛋白,纯化后浓度分别达到200 μg/ml和300 μg/ml.Western Blot结果显示,重组蛋白可被抗His标签抗体特异识别;免疫小鼠获得多克隆抗体效价分别为抗pET32a-F1高1:640,抗pET32a-F2高1:40 960.IFA显示抗pET32a-F1、抗pET32a-F2多克隆抗体均可与人偏肺病毒作用产生特异性荧光.结论 成功构建了F1、F2的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中获得高效表达,该蛋白具有良好的抗原性;免疫小鼠获得特异性多克隆抗体,有利于人偏肺病毒的深入研究.
友情链接