首页>疾病监测杂志
  • 杂志名称:疾病监测杂志
  • 主管单位:中国疾病监测
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-2928/R
  • 国内刊号:11-2928/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:荣获2003年《CAJ-CD规范》执行优秀期刊奖期刊收录:知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
疾病监测杂志2013年第07期

丙型流感病毒RNA标准品的制备和实时荧光定量-反转录聚合酶链反应检测方法的建立

蓝雨;赵翔;李晓丹;隗合江;王大燕;舒跃龙

关键词:流感病毒, 丙型流感病毒, 实时荧光定量-反转录聚合酶链, 检测
摘要:目的 通过分析GenBank中丙型流行性感冒(流感)病毒的序列,建立丙型流感病毒实时荧光定量-反转录聚合酶链反应(rRT-PCR)检测方法,并制备丙型流感病毒的RNA标准品.方法 下载GenBank中丙型流感病毒的序列,使用Beacon Designer 8软件在保守区域设计特异性引物和TaqMan荧光探针.人工合成病毒HE、NP、MP和NS基因序列,克隆到pBluescriptⅡ SK(+)质粒载体,进一步通过体外转录获得RNA模板,并验证检测方法的检测极限值和特异性.结果 建立了针对丙型流感病毒HE、NP、MP和NS基因的快速、可靠的实时荧光定量RT-PCR检测方法,同时制备了RNA标准品.结论 本文建立的丙型流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法,可以在日常监测和临床鉴定中快速、准确地检测丙型流感病毒.