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  • 杂志名称:疾病监测杂志
  • 主管单位:中国疾病监测
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-2928/R
  • 国内刊号:11-2928/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:荣获2003年《CAJ-CD规范》执行优秀期刊奖期刊收录:知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
疾病监测杂志2011年第09期

阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR检测方法的研究

孟双;李娟;白雪梅;王艳;叶长芸

关键词:阪崎肠杆菌, 实时荧光TaqMan PCR, 外膜蛋白A
摘要:目的 建立阪崎肠杆菌的TaqMan PCR检测方法.方法 将阪崎肠杆菌的菌悬液连续10倍稀释后与健康人新鲜粪便混匀,制备成1.2×10(0)~1.2×10(8) cfu/ml梯度浓度的粪便模拟标本并提取DNA,用以评价阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR法对临床模拟标本检测的灵敏度、特异性和稳定性.结果 实时荧光TaqMan PCR法对阪崎肠杆菌粪便模拟标本的检测灵敏度为1.2×10(3) cfu/nd;其线性检测范围为:1.2×10(3)~1.2×10(8) cfu/ml;在稳定性评价中,对含菌量为1.2×10(8)、1.2×10(6)和1.2×10(4) cfu/ml的粪便模拟标本进行实时荧光TaqMan PCR法重复检测10次,结果显示扩增反应Ct值的变异系数(CV)为0.65%~1.47%;在特异性评价中,除了阳性对照其余样本均未见特异性扩增曲线.结论 本研究建立了阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR法.